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标准培养基的试验步骤主要分为两步

发布时间:2021-03-22浏览:164次
  鉴别标准培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。
  标准培养基的试验步骤
  1)制备细胞悬液
  A取长成致密单层的细胞种子,将原细胞培养液从细胞培养瓶内吸出,用适量平衡盐溶液洗细胞一次,弃洗液(去除死细胞)。
  B向细胞培养瓶内加入胰蛋白酶溶液1ml,消化一定时间,在显微镜下观察,当细胞变圆接近脱壁时,将胰蛋白酶溶液倒掉。
  C根据细胞数量加入一定量细胞培养液,用吸管吹打,使细胞脱壁制成细胞悬液A。
  2)细胞培养
  A吸取一定量的细胞悬液A,加到细胞培养瓶内。
  B向细胞培养瓶内加至10ml含体积分数为3%或10%的小牛血清的细胞培养液,使细胞接种数量为5×104细胞/ml。
  C将细胞培养瓶送入培养箱,在(37±1)℃温度条件及(5±0.1)%二氧化碳条件下进行培养。
  D培养72h,观察细胞形态,按照2.7.1.4步骤1)方法制备细胞悬液,进行活细胞计数。
  E培养72h后,更换不含牛血清的细胞培养液10ml,继续培养48h,观察细胞形态,按照2.7.1.4试验步骤1)方法制备细胞悬液,进行活细胞计数。