标准菌种临时存放及活化的详细步骤

　　A.低温保存管之临时存放及解冻中之一般标准菌种临时存放及活化

　　步骤一：低温保存管应存放于－20~－80之低温条件下.

　　步骤二：准备37之70﹪(V/V)酒精浴槽(只能在电气水浴槽中改放酒精,不可以火加温,以免危险;若以37水浴取代,应避免水中微生物污染),其中事先安放小试管架(可放置低温保存管之大小),液面不可高达管塞.

　　步骤三：将低温保存管从低温保存条件中取出,置于37浴槽之小试管架上.

　　步骤四：不断轻微摇动低温保存管,液面不可高至管塞,直至结冰*溶解(约需2分钟).

　　日水平板培养基图片

　　B.菌株活化:在无菌操作下

　　步骤一：用无菌微量吸管,从已溶解之低温保存管吸取1-2滴之菌液,滴入固态培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近,以划线法接种于培养基.

　　步骤二：将接种好的培养基置于温度的培养箱中培养.

　　C.划线法

　　步骤一：手持金属接种环,用酒精灯将接种环(共约5公分)烧至火红,并不断来回烧烤金属固定杆之前约10公分,等待约10秒钟,将接种环前端轻触培养基边缘凝胶(无菌体部份),待接种环*冷却后,以环沾黏菌滴,由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线,直到涵盖1/3培养基为止(I区).

　　步骤二：灼烧接种环,待数秒冷却后,旋转培养基自I区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域(II区).

　　步骤三：重复2的动作完成III区与IV区.

　　步骤四：灼烧接种环,将接种环归位.

　　标准菌种使用注意事项

　　1、菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放置会导致菌种衰退；

　　2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；

　　3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能正常生长；

　　4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来电询问；

　　5、某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态；培养过程中亦要保

　　持厌氧状态；

　　6、某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促进生长；

　　7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。

　　8、部分菌种有致病性、扩散性，请专业人员在专业环境下有保护性操作。