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标准培养基操作中,主要分为以下几步顺序不要搞错了

发布时间:2020-12-10浏览:59次
  标准培养基的步骤:
  (一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
  (二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节pH值到适宜范围内。
  (三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
  (四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
  (五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
  标准培养基的营养协调
  微生物细胞组成元素的调查或分析,是设计培养基时的重要参考依据。
  微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。
  在大多数化能异养菌的培养基中,各营养要素间在量上的比例大体符合以下十倍序列的递减规律:
  要素:H2O>C源+能源>N源>P、S>K、Mg>生长因子
  含量:(~10-1)(~10-2)(~10-3)(~10-4)(~10-5)(~10-6)
  A.选择适宜的营养物质,实验室的常用培养基:
  细菌:牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基);
  放线菌:高氏1号合成培养基培养;
  酵母菌:麦芽汁培养基;
  霉菌:查氏合成培养基;
  实验室一般培养:普通常用培养基;
  遗传研究:成分清楚的合成培养基;
  生理、代谢研究:选用相应的培养基配方;
  B.营养物质浓度及配比合适
  营养物质的浓度适宜,营养物质之间的配比适宜;
  高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑制或杀菌作用。
  培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。
  真菌需C/N比较高的培养基;(素食)
  细菌(动物病原菌)需C/N比较低的培养基;(荤食)